Bioprocesamiento previo para la fabricación de vectores virales (parte 2)

En este blog, continuaremos explorando las diferentes tecnologías utilizadas para la fabricación de vectores virales. ¿Te perdiste la parte 1? Ver aquí.

Célula de suspensión de escalado para la fabricación de vectores

Los investigadores en el campo de los vectores virales están explorando el uso de líneas celulares adaptadas en suspensión para la producción de vectores basados en transfecciones transitorias. La adaptación de las líneas celulares dependientes del apego a un modo de cultivo en suspensión puede extender la línea de tiempo para la fase de desarrollo. Sin embargo, una vez que se generan las células óptimas, ya no se requiere el uso de sustratos para la unión y el crecimiento celular.

Los cultivos de células en suspensión tienen un número significativo de beneficios sobre las células adherentes. Éstos incluyen:

• Fácil escalado desde plataformas de matraces giratorios o agitadores a escala de laboratorio hasta escalas de biorreactores, sin conexión ni separación de células.
• La variedad de líneas celulares HEK293 utilizadas para la producción de vectores son fáciles de adaptar al modo de suspensión cuando se cultivan en un medio químicamente definido o sin suero.
• El medio libre de componentes animales agrega aún más beneficios a escala de fabricación al reducir los pasos de purificación posteriores, así como al reducir el riesgo regulatorio asociado con agentes adventicios.

La industria ha utilizadobiorreactores de tanque agitado para la fabricación comercial de proteínas recombinantes y anticuerpos monoclonales durante décadas. Estos ofrecen muchas ventajas, incluyendo:

• Tecnología que ha sido adoptada por la industria y optimizada para la producción de productos biológicos.
• Muchos medicamentos producidos en esta plataforma han sido aprobados para su uso por agencias reguladoras globales.
• Capacidad comprobada para escalar a gran volumen de fabricación.

Este tipo de plataforma de biorreactor se puede utilizar tanto para células adherentes mediante el uso de microportadores para células dependientes de la unión como para células en suspensión para la producción de vectores a gran escala.

Líneas de células productoras estables

Las líneas celulares productoras estables se modifican genéticamente para expresar los genes auxiliares a través de promotores inducibles, genes de empaquetamiento y el gen de interés para la producción de vectores virales. Las líneas celulares productoras estables pueden simplificar los pasos de fabricación de vectores virales al eliminar los pasos de transfección con múltiples plásmidos, reducir los costos al eliminar el requisito del costoso plásmido cGMP y minimizar los requisitos reglamentarios al generar una línea celular con un historial claro.

Las terapias de terapia génica actualmente aprobadas o en fase clínica tardía se centran principalmente en el tratamiento de trastornos genéticos raros, donde el número de pacientes objetivo y los requisitos de partículas virales por dosis son relativamente pequeños. Sin embargo, la comercialización de tratamientos para enfermedades como el Alzheimer, el Parkinson, la artritis reumatoide y la hemofilia plantea un importante desafío de fabricación porque la partícula viral por dosis puede aumentar significativamente (por logaritmos) y las poblaciones de pacientes son mucho mayores. Se espera que el desarrollo de líneas celulares estables mejore significativamente la producción de vectores virales en las escalas necesarias para estas terapias con una gran demanda terapéutica y títulos de vectores virales más altos.

El desarrollo estable de líneas celulares productoras puede implicar largos plazos de desarrollo que aumentarán el tiempo de comercialización. Sin embargo, una vez que la línea de células productoras se diseña y clona para producir una mayor densidad celular y un título de vector viral, el proceso debería ser, en última instancia, más productivo y escalable.

Muchas empresas están buscando activamente el desarrollo de líneas de células humanas diseñadas que estén adaptadas para crecer en un medio sin suero en cultivo en suspensión. Se espera que el cambio hacia líneas celulares productoras humanas estables alivie los problemas de seguridad regulatorios y proporcione una mayor estabilidad in vivo a los vectores virales al proporcionar patrones de glicosilación humana.

Está claro que el panorama de la terapia génica está cambiando rápidamente y los avances tecnológicos están preparados para facilitar la entrada en este revolucionario campo de la medicina. Pall se dedica a proporcionar tecnologías habilitadoras y plataformas de un solo uso totalmente integradas que permitirán la producción de productos de terapia génica asequibles y de alta calidad.

Descubre más en el próximo blog de terapia génica: Soluciones Integradas para Terapia Génica.

Referencias:

1. https://labiotech.eu/sponsored/producing-adeno-associated-virus-vectors-cevec/
2. https://www.pharmasalmanac.com/articles/transient-transfection-at-a-large-scale-for-flexibility-in-clinical-and-commercial-vector-manufacturing