Die Reinigungsmethode unterstützt die COVID–19Untersuchung des Schweregrads

Weltweit ringen Wissenschaftler darum,  zu verstehen, warum COVID–19 die Krankheitssymptome bei den Patienten so unterschiedlich stark ausgeprägt sind, und  obwohl im vergangenen Jahr viel über das Virus gelernt wurde, gibt es immer noch kaum Erkenntnisse darüber, warum einige Patienten anscheinend zu einer schweren Erkrankung neigen.

In der kürzlich veröffentlichten Studie in der Fachzeitschrift Glycobiologygy ^[1]   haben Wissenschaftler das Fachwissen und die Ressourcen verschiedener europäischer Forschungsinstitute gebündelt, um zu untersuchen,  wie die Veränderung der Proteinaktivität durch Glykosylierung (das Hinzufügen verschiedener Kohlenhydratgruppen)  eine Vorhersage des Schweregrads COVID–19 ermöglichen kann.

Forschungsergebnisse haben gezeigt, dass einige  COVID–19Patienten aufgrund einer Überaktivierung ihres Immunsystems extrem krank werden können. Da die Aktivität von Immunproteinen mit ihrem Glykosylierungszustand zusammenhängt, beschloss die Gruppe der Forscher, die mit IgG (dem häufigsten Antikörpertyp des Menschen) assoziierten Glykangruppen genauer unter die Lupe zu nehmen. Vorherige Studien haben gezeigt, dass die IgG-Variabilität von Person zu Person mit der klinischen Variabilität der Immunantwort zusammenhängen kann.

Für ihre Studie erhielten die Forscher Plasmaproben von 166 COVID–19 Patienten mit schwerer Krankheit und 167 Patienten mit leichten Krankheitssymptomen. IgG wurde aus jeder Probe durch Standard-Antikörperreinigung isoliert, wobei Plasmaproben in eine 96–well -Proteinreinigungsplatte pipettiert werden, die mit a verbunden ist Pall-Vakuumverteiler und Vakuumpumpe, um die Waschschritte aufzunehmen. Nach der IgG-Reinigung wurden N-Glycan-Gruppen enzymatisch von den IgG-Molekülen entfernt.

Um die Glykanproben für die Analyse vorzubereiten, markierten die Wissenschaftler die Glykane zunächst mit einem fluoreszierenden Tag und reinigten die Proben dann mit  AcroPrep 0,2 μm Supor 96–well Filterplatten als stationäre Phase.

Palls AcroPrep-Filterplatten sind in einer Reihe von Formaten erhältlich, von 384–well Platten, die für 80 μL-Proben geeignet sind, bis hin zu 24–well Platten , die Probenvolumina von  bis zu 7 ml aufnehmen können. AcroPrep Filterplatten werden auch in einer Reihe von Membrantypen und Größenabschnitten angeboten , um verschiedenen Forschungsanwendungen gerecht zu werden.

Im Anschluss an die Reinigung wurden unterschiedliche  Glykangruppen durch Flüssigchromatographie abgetrennt , und die Ergebnisse verschiedener  Patientenproben wurden miteinander verglichen, um statistische Unterschiede in der Art und Häufigkeit der vorhandenen Glykangruppen zu ermitteln. Die Forscher stellten signifikante Unterschiede in der IgG-Glykanmodifikation zwischen schwer kranken und leicht kranken COVID–19 Patienten fest. Der auffälligste Unterschied war die Abnahme einer Form einer bestimmten Kohlenhydratgruppe, dem N-Acetylglucosamin (GlcNAc).

Bekanntlich stehen Faktoren der Proteinmodifikation, einschließlich der Glykosylierung, in Zusammenhang mit dem Altern und mit Krankheiten wie Diabetes. Die Autoren sind der Meinung, dass diese bedeutende Erkenntnis zu einem besseren Verständnis der Ursachen für die COVID–19 Anfälligkeit führen wird und wie die am meisten gefährdeten Personen geschützt werden können.

Pall unterstützt von ganzem Herzen die biomedizinische Forschung, die sich auf die Bekämpfung von COVID–19. Weitere Informationen zu unseren COVID–19 Workflow-Lösungen finden Sie in unseren  COVID–19Hinweisen zu den Lösungen.

Literatur:

1. Petrovic T., et al. Die Zusammensetzung des Immunglobulin-G-Glykoms steht in direktem Verhältnis zum Schweregrad der COVID–19. Glykobiologie. Nov. 2020.