PROTEINKONZENTRATION UND PUFFERAUSTAUSCH

Entdecken Sie die Lösungen von Pall Laboratory für die Aufreinigung von Biomolekülen und Ultrafiltration.

Der Prozess steht im Mittelpunkt

Mit uns kommen Sie mit weniger Schritten zur richtigen Lösung.

Die Aufreinigung von Biomolekülen umfasst eine komplexe Reihe von Arbeitsschritten, in denen Moleküle mittels aufeinanderfolgender Prozesse selektiv separiert werden. Bei der Separation muss die Probe prozessbedingt oft entsalzt oder konzentriert werden, um die entnommenen Biomoleküle auf den nächsten Schritt des Reinigungsverfahrens vorzubereiten. Wir bieten mehrere Technologien für eine effiziente Konzentrierung und Entsalzung von Proben sowie für den Pufferaustausch an, darunter Ultrafiltrations-Zentrifugeneinheiten (UF) und UF-Mikrotiterplatten.

 

Bei der Ultrafiltration wird eine Proteinlösung durch eine Membran mit definierter Trenngrenze für das Molekulargewicht gedrückt. Das Protein kann die Membran nicht passieren, im Gegensatz zu den anderen Pufferkomponenten. Das Verfahren ist meist relativ schnell und beeinträchtigt die Proteinprobe nicht. Ultrafiltration erfolgt mittels Zentrifugation. Die Proteinprobe wird in der Zentrifugeneinheit platziert, die rotiert, bis die über dem Filter verbleibende Proteinlösung das gewünschte Volumen erreicht hat. Das Filtrat kann ebenfalls zurückgewonnen und evaluiert werden. 

 

Weitere gängige Anwendungen für diese Einheiten sind Pufferaustausch und Entsalzung.  Einige Downstream-Anwendungen sind extrem anfällig für Salz, zum Beispiel Gelelektrophorese, NMR, Röntgenkristallographie und Massenspektrometrie. Vor diesen Anwendungen muss das Salz abgeschieden werden. Eine Möglichkeit hierzu ist die Verwendung von Zentrifugenkonzentratoren wie die Modelle Nanosep® und Nanosep MF.

 

Unsere Ultrafiltrations-Zentrifugeneinheiten (UF) ermöglichen ein reines Produkt mit > 90 % Rückgewinnungen in wenigen Minuten. Ultrafiltration ist ein Membranverfahren, das durch die Auswahl nach Molekulargewicht funktioniert. Allerdings können auch andere Faktoren wie Form und Ladung der Moleküle eine Rolle spielen. Moleküle, die größer sind als die Poren der UF-Membran, werden auf der Membranoberfläche zurückgehalten. Die Lösungsmittel und kleinere gelöste Moleküle gelangen hingegen durch die Membran in das Filtrat. Der Größenausschluss der UF-Membran führt zu einer Konzentration des gelösten Proteins im verbleibenden Teil der Probe (dem sg. Retentat). Dieses kann von oberhalb der Membran zurückgewonnen werden.

 

Wir führen ein vollständiges Angebot an Ultrafiltrationsgeräten für diverse Probengrößen. Diese Zentrifugeneinheiten sind speziell auf schnellere Durchflussraten und einfachere Handhabung ausgelegt. Die Geräte sind mit einer Omega Ultrafiltrationsmembran mit geringer Proteinbindung erhältlich.

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Die Leitfäden zur Auswahl der Nanosep- und Mikrosep-Konzentration sollen Ihnen als Empfehlung für die Konzentration von Proteinproben dienen. Das Gesamtvolumen der Flüssigkeit im Gerät bestimmt das endgültige Retentatvolumen. Durch Zugabe von Puffer unter dem Geräteeinsatz können Sie Ihr Deadstop-Volumen einstellen und damit den Konzentrationsfaktor wählen.

Füllen Sie dieses Formular aus, um eine Musterpackung Zentrifugeneinheit anzufordern. Je nach Ihren speziellen Bedürfnissen wird Pall  Ihnen den für Ihre Anforderungen geeigneten Zentrifugenkonzentrator schicken.